بررسی ترانسفورماسیون گیاه نارنج (c. aurantium) با ژن کد کننده ی پوشش پروتئینی ویروس تریستزای مرکبات (ctv)

در این پژوهش به منظور به دست آوردن گیاهان تراریخت نارنج از ترانسفورماسیون قطعات اپی کوتیل و هیپوکوتیل نارنج به واسطه ی اگروباکتریوم استفاده شد. ترانسفورماسیون این قطعات از طریق هم کشتی با سویه ی eha105 اگروباکتریوم تومفاشینس حامل وکتور pfgc5941 دارای ژن کد کننده ی پوشش پروتئینی ویروس تریستزای مرکبات انجام شد. این مطالعه با هدف القای مقاومت به بیماری تریستزا و هم چنین بهبود شرایط باززایی گیاهان تراریخت انجام شده است. ریزنمونه-ها از گیاهچه هایی تهیه شدند که به مدت 4 هفته در تاریکی رشد کرده بودند، و گیاهچه هایی که پس از 4 هفته رشد در تاریکی یک دوره ی روشنایی 10 روزه با فتوپریود 16 ساعته را طی کرده بودند. محیط کالوس زایی و انتخابی با ترکیبی از سطوح هورمونیbap (mg/l 2, 1, 0) و naa ( mg/l5/0, 25/0, 0) تهیه شد و در محیط رشد شاخساره سطوح مختلف ga3 (mg/l 1, 5/0, 0) استفاده شد. اثر زخم زدن با ایجاد برش طولی در انتهای ریزنمونه ها و هم چنین اثر استفاده از وکیوم بر کارایی ترانسفورماسیون مورد بررسی قرار گرفت. تأیید ترانسفورماسیون با انجام واکنش pcr صورت گرفت و بهترین نتایج با استفاده از ترکیب هورمونی bap mg/l2 و naa mg/l25/0 از گیاهانی که پس از رشد در تاریکی دوره ی روشنایی را طی کرده بودند، در حضور mg/l ga3 1 و با انجام وکیوم به دست آمد.